Gene de virulência oipA de Helicobacter pylori como marcador molecular de gastropatias severas / Helicobacter pylori oipa virulence gene as a molecular marker of severe gastropathies

ABSTRACT Background: Helicobacter pylori is an etiologic agent of gastroduodenal diseases. The microorganism, considered a type I carcinogen, affects about 50% of the global population. H. pylori virulence factors are determinant for the clinical outcome of the infection. The outer inflammatory protein A (oipA) gene encodes an outer membrane adhesin and is related to severe gastropathies, such as gastric cancer. Objective: The aim of this study was to evaluate the association of the oipA gene with the severity of gastroduodenal diseases in dyspeptic patients in region Central Brazil. Methods: The polymerase chain reaction (PCR) was used to determine the presence of H. pylori. Samples positives were used for molecular screening of the oipA gene. Gastropathies were categorized as non-severe and severe diseases. Results: Approximately 68% of patients had H. pylori and 36% were infected with H. pylori oipA+ strains. Infection was significantly associated in patients aged over 44 years (P=0.004). However, there was no association between oipA and patients' age (P=0.89). Approximately 46% of patients infected with oipA+ strains had some severe illness. Gastric adenocarcinoma was the most frequent severe gastropathy. The H. pylori oipA genotype was inversely associated with the severity of gastroduodenal diseases (OR=0.247, 95%CI: 0.0804-0.7149 and P=0.007). Conclusion: The characterization of possible molecular markers will contribute to personalized medicine, impacting the prognosis of patients.

RESUMO Contexto: Helicobacter pylori é um agente etiológico de doenças gastroduodenais. O microrganismo, considerado cancerígeno tipo I, afeta cerca de 50% da população mundial. Os fatores de virulência do H. pylori são determinantes para o desfecho clínico da infecção. O gene da proteína inflamatória externa A (oipA) codifica uma adesina da membrana externa e está relacionado a gastropatias severas, como o câncer gástrico. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar a associação do gene oipA com a gravidade das doenças gastroduodenais em pacientes dispépticos na região Brasil Central. Métodos: A reação em cadeia da polimerase (PCR) foi utilizada para determinar a presença de H. pylori. Amostras positivas foram utilizadas para triagem molecular do gene oipA. As gastropatias foram categorizadas como doenças não severas e severas. Resultados: Aproximadamente 68% dos pacientes apresentaram H. pylori e 36% estavam infectados com cepas H. pylori oipA+. A infecção foi significativamente associada em pacientes com idade superior a 44 anos (P=0,004). No entanto, não houve associação entre oipA e a idade dos pacientes (P=0,89). Aproximadamente 46% dos pacientes infectados com cepas oipA+ tiveram alguma doença severa. O adenocarcinoma gástrico foi a gastropatia severa mais frequente. O genótipo oipA de H. pylori foi inversamente associado à gravidade das doenças gastroduodenais (OR=0,247, IC95%: 0,0804-0,7149 P=0,007). Conclusão: A caracterização de possíveis marcadores moleculares contribuirá para a medicina personalizada, impactando no prognóstico dos pacientes.

Bacterial adhesion on conventional and self-ligating metallic brackets after surface treatment with plasma-polymerized hexamethyldisiloxane

ABSTRACT Introduction: Plasma-polymerized film deposition was created to modify metallic orthodontic brackets surface properties in order to inhibit bacterial adhesion. Methods: Hexamethyldisiloxane (HMDSO) polymer films were deposited on conventional (n = 10) and self-ligating (n = 10) stainless steel orthodontic brackets using the Plasma-Enhanced Chemical Vapor Deposition (PECVD) radio frequency technique. The samples were divided into two groups according to the kind of bracket and two subgroups after surface treatment. Scanning Electron Microscopy (SEM) analysis was performed to assess the presence of bacterial adhesion over samples surfaces (slot and wings region) and film layer integrity. Surface roughness was assessed by Confocal Interferometry (CI) and surface wettability, by goniometry. For bacterial adhesion analysis, samples were exposed for 72 hours to a Streptococcus mutans solution for biofilm formation. The values obtained for surface roughness were analyzed using the Mann-Whitney test while biofilm adhesion were assessed by Kruskal-Wallis and SNK test. Results: Significant statistical differences (p< 0.05) for surface roughness and bacterial adhesion reduction were observed on conventional brackets after surface treatment and between conventional and self-ligating brackets; no significant statistical differences were observed between self-ligating groups (p> 0.05). Conclusion: Plasma-polymerized film deposition was only effective on reducing surface roughness and bacterial adhesion in conventional brackets. It was also noted that conventional brackets showed lower biofilm adhesion than self-ligating brackets despite the absence of film.

RESUMO Introdução: a deposição de filme de polímero a plasma foi criada para modificar as propriedades de superfície dos braquetes ortodônticos metálicos, com o intuito de inibir a adesão bacteriana. Métodos: filmes finos de polímero de hexametildisiloxano (HMDSO) foram depositados em braquetes ortodônticos de aço inoxidável convencionais (n = 10) e autoligáveis (n = 10), utilizando a técnica de radiofrequência PECVD (Plasma-Enhanced Chemical Vapor Deposition). As amostras foram divididas em dois grupos, de acordo com o tipo de braquete, e dois subgrupos após o tratamento de superfície. A microscopia eletrônica de varredura (MEV) foi realizada para avaliar a presença de adesão bacteriana sobre as superfícies das amostras (região de ranhura horizontal e aletas) e a integridade da camada de filme. A Interferometria Confocal (CI) avaliou a rugosidade, e a molhabilidade superficial foi avaliada por goniometria. Para análise de adesão bacteriana, as amostras foram expostas durante 72 horas a uma solução de Streptococcus mutans, para formação de biofilme. Os valores obtidos para a rugosidade da superfície foram analisados pelo teste de Mann-Whitney, enquanto a adesão do biofilme foi avaliada pelos testes de Kruskal-Wallis e SNK. Resultados: observaram-se diferenças estatisticamente significativas (p <0,05) para a rugosidade superficial e redução da adesão bacteriana em braquetes convencionais após o tratamento da superfície, e entre braquetes convencionais e autoligáveis. Não foram observadas diferenças estatísticas significativas entre os grupos autoligáveis (p> 0,05). Conclusão: a deposição de polímero a plasma só foi efetiva na redução da rugosidade superficial e adesão bacteriana em braquetes convencionais. Observou-se, também, que os braquetes convencionais apresentaram menor adesão ao biofilme do que os braquetes autoligáveis, apesar da ausência de filme.

Sobrevivência de patógenos de origem alimentar aderidos em aço inoxidável após aplicação de óleo essencial de Cymbopogon flexuosus / Survival of foodborne pathogens adhered Survival of foodborne pathogens adhered to the stainless steel after applying the Cymbopogon flexuosus essential oil

Foi avaliada a atividade antimicrobiana de diferentes concentrações do óleo essencial (OE) de Cymbopogon flexuosus sobre as estirpes padrão de Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Salmonella Choleraesuis aderidas em superfície de aço inoxidável AISI 304 #4. Inicialmente, as concentrações inibitórias mínimas (CIM) e as concentrações bactericidas mínimas (CBM) do OE foram determinadas pela técnica de macrodiluição em caldo. Posteriormente, a adesão e a formação de biofilme em superfícies de aço inoxidável foram avaliadas por 15 h a 37 °C sob agitação, e a ação sanitizante do OE contra as células aderidas nos cupons após 20 e 40 min de contato. O valor da CIM encontrada para todas as espécies foi de 7,5 μL.mL-1, e esta concentração foi utilizada para o preparo da solução sanitizante. Após ambos os períodos de sanitização constatou-se a remoção total das células aderidas para as espécies de E. coli e S. Choleraesuis. Não foi possível eliminar as células aderidas de S. aureus, contudo, houve uma redução quando comparada ao número de células aderidas antes de serem submetidas aos tratamentos de sanitização. O OE de C. flexuosus pode ser uma alternativa no controle microbiano em superfícies durante o processamento de alimentos.

The objective of this study was to evaluate the antimicrobial activity of different concentrations of essential oil (EO) of Cymbopogon flexuosos on the standard strains of Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Salmonella Choleraesuis adhered to the stainless steel surface AISI 304 #4. Initially, the minimum inhibitory concentrations (MIC) and the minimum bactericidal concentrations (MBC) were determined by means of EO macrodilution broth assay. Subsequently, the adhesion and the biofilm formation on stainless steel surface were evaluated for 15 h at 37 °C under agitation, and also the OE sanitizing action against adherent cells on the coupons after 20 and 40 min of contact. The MIC value found for all species was 7.5 μL.mL-1, which is the concentration used for preparing the sanitizing solution. A complete removal of adhered cells of E. coli and S. Choleraesuis occurred after being exposed during both periods of time. The adhered cells of S. aureus were not removed; however, a reduction in the number of adhered cells was detected when compared to that quantity showed before being subjected to sanitizing treatments. The EO of C. flexuosus might be an alternative for microbial control in surfaces during food processing.

Sanitização de cenoura minimamente processada com nanopartículas de prata / Sanitization of minimally processed carrot with silver nanoparticles

A produção de cenoura em grande escala na região de Rio Paranaíba coloca essa região em posição de destaque no cenário nacional. No entanto, é relatado que ocorre significativa quantidade de sobras após a colheita. O aproveitamento do material descartado na cadeia de alimentos pode se concretizar pelo processamento mínimo, como uma alternativa de agregação de valor. A etapa de sanitização é de extrema importância durante a produção de vegetais minimamente processados. Nesse contexto, objetivou-se estudar o efeito antimicrobiano de nanopartículas de prata na sanitização de cenoura minimamente processada, obtida a partir do aproveitamento das sobras de cenouras da colheita da cidade de Rio Paranaíba, bem como o estudo da termodinâmica de adesão de diferentes estirpes bacterianas na superfície da cenoura sanitizada. Observou-se que as nanopartículas de prata (6mg L^-1)apresentaram bons resultados, quando comparadas aos sanitizantes hipoclorito de sódio (100mg L^-1) e dicloroisocianurato de sódio (150mg L^-1), na descontaminação da cenoura minimamente processada sobre microrganismos mesófilos aeróbios; Pseudomonasspp.; bactérias láticas; e coliformes a 35ºC. Verificou-se também que a superfície da cenoura apresenta características hidrofílicas que podem dificultar a adesão bacteriana. Esse fato foi confirmado na avaliação de termodinâmica de adesão, que foi desfavorável paraStaphylococcus aureus, Escherichia colie Listeria innocua, sendo mais desfavorável para as interações envolvendo as superfícies de cenoura sanitizadas com nanopartículas de prata.

The carrot production on a large scale in the region of Rio Paranaiba places the region in a prominent position on the national scene. However, it is reported that a significant amount of scraps occurs after harvest. The use of discarded material in the food chain can be realized by minimal processing, as an alternative of adding value. A sanitization step is very important during the production of minimally processed vegetables. In this context, this research aimed to study the antimicrobial effect of silver nanoparticles in the sanitization of minimal processing carrot from discarded carrot harvested at Rio Paranaiba city, as well as study the thermodynamics adhesion for different bacterial strains in sanitized carrot surface. It was observed that silver nanoparticles (6mg L^-1) showed good results when was compared to sodium hypochlorite (100mg L^-1) and sodium dichloroisocyanurate (150mg L^-1) in reducing populations of aerobic mesophilic microorganism;Pseudomonasspp. lactic acid bacteria and coliforms at 35ºC present in carrot. It was also found that the surface of carrot has hydrophilic characteristics which can prevent bacterial adhesion. This fact was confirmed that thermodynamic evaluation of adhesion that was unfavorable for Staphylococcus aureus, Escherichia coliand Listeria innocua, and more thermodynamically unfavorable for interactions involving carrot surfaces sanitized with silver nanoparticles.

Colonização bacteriana na região marginal de restaurações cerâmicas: efeito do método de remoção do cimento e do polimento / Bacterial colonization in the marginal region of ceramic restorations: effects of cement removal methods and polishing

O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes métodos de remoção do excesso de cimento e do polimento na formação de biofilme e micromorfologia na região de margem dente/restauração. A partir de dentes bovinos, foram obtidos 96 blocos de dentina (4 mm x 8 mm x 2 mm) que foram moldados e reproduzidos em gesso tipo IV, sobre os quais foram produzidos 96 blocos prensados de cerâmica (Vita PM9,Vita Zahnfabrik; 4 mm x 8 mm x 2 mm) pela técnica de cera perdida. Os blocos de dentina e seus respectivos blocos cerâmicos foram cimentados com um cimento resinoso auto-adesivo (RelyX U200, 3M ESPE) e o excesso de cimento foi removido utilizando diferentes técnicas: MBr:micro brush e fotoativação, MBr-Pol: micro brush, fotoativação e polimento,Pi: pincel e fotoativação, Pi-Pol: pincel, fotoativação e polimento, Foto-Expl: 5 s de fotoativação inicial, explorador e fotoativação final, Foto-Expl- Pol: 5 s de fotoativação inicial, explorador, fotoativação final e polimento, Foto-Bi: 5 s de fotoativação inicial, bisturi e fotoativação final, Foto-Bi-Pol: 5s de fotoativação inicial, bisturi, fotoativação final e polimento. Após 24 h, a rugosidade da região de margem das amostras foi analisada utilizando um rugosímetro (Mitutoyo SJ-400 Tóquio, Japão; três medições em cada amostra). Análise micromorfológica da região foi obtida por microscópio estereoscópico e MEV. Em seguida, as amostras foram contaminadas em caldo de sacarose com suspensão padronizada com Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus e Candida albicans e incubados por um período de 48 h. As amostras foram analisadas quantitativamente para aderência bacteriana na região da margem por microscopia de varredura confocal a laser e contagem das unidades formadoras de colônias(UFC/mL), e analisadas qualitativamente usando MEV. Os dados de rugosidade superficial (Ra) foram submetidos à análise de variância (2- way), teste de Tukey (5%) e teste t-student...

This study evaluated the effects of excess cement removal techniques,with or with out posterior polishing, on the biofilm formation and micromorphology in the marginal region of the tooth/restoration. From bovine teeth, 96 dentin blocks (4 x 8 x 2 mm) were produced, molded andre produced in type IV gyps um, on which 96 pressed ceramic blocks (VitaPM9 4 mm x 8 mm x 2 mm, Vita Zahnfabrik) were produces via lost wax technique. The dentin blocks and their respective ceramic blocks were cemented with a self-adhesive resin-cement (RelyX U200, 3M ESPE) and cement excess was removed using different techniques, followed by polishing with silicone tips or, in some cases, not polished at all: MBr:microbrush and photo activation, MBr-Pol: MBr + polishing, Pi: brush andphotoa ctivation, Pi-Pol: PI + polishing, Photo-Expl: 5 s initial photo activation, explorer and final curing, Photo-Expl-Pol: Photo-Expl +polishing, Photo-Bi: 5 s initial photo activation, scalpel and final curing,Photo-Bi-Pol: Photo-Bi + polishing. After 24 hours, the samples marginal region roughness was analyzed using a profilometer (Mitutoyo SJ-400 Tokyo, Japan; three measurements on each sample). Micromorphological analyses of the region were performed by stereoscopic microscope andSEM. Then the samples were contaminated with sucrose broth standardized suspension with Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus and Candida albicans and incubated for a period of 48 hours. The samples were quantitatively analyzed for bacterial adherence in the marginal region by confocal laser scanning microscopy and counting ofcolony forming units (CFU/ml), and qualitatively analyzed using SEM.Roughness data (Ra) were submitted to 2-way ANOVA, Tukey test (5%)and Student's-t tests. CFU, Biomass and bio thickness data were analyzedby Kruskal Wallis’, Mann-Whitney’s e Dunn’s tests. The removing technique statistically influenced the roughness (Ra; p ˂ 0.05), when comparing polished and un polished groups...

Colonização bacteriana na região marginal de restaurações cerâmicas: efeito do método de remoção do cimento e do polimento / Bacterial colonization in the marginal region of ceramic restorations: effects of cement removal methods and polishing

O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes métodos de remoção do excesso de cimento e do polimento na formação de biofilme e micromorfologia na região de margem dente/restauração. A partir de dentes bovinos, foram obtidos 96 blocos de dentina (4 mm x 8 mm x 2 mm) que foram moldados e reproduzidos em gesso tipo IV, sobre os quais foram produzidos 96 blocos prensados de cerâmica (Vita PM9,Vita Zahnfabrik; 4 mm x 8 mm x 2 mm) pela técnica de cera perdida. Os blocos de dentina e seus respectivos blocos cerâmicos foram cimentados com um cimento resinoso auto-adesivo (RelyX U200, 3M ESPE) e o excesso de cimento foi removido utilizando diferentes técnicas: MBr:micro brush e fotoativação, MBr-Pol: micro brush, fotoativação e polimento,Pi: pincel e fotoativação, Pi-Pol: pincel, fotoativação e polimento, Foto-Expl: 5 s de fotoativação inicial, explorador e fotoativação final, Foto-Expl- Pol: 5 s de fotoativação inicial, explorador, fotoativação final e polimento, Foto-Bi: 5 s de fotoativação inicial, bisturi e fotoativação final, Foto-Bi-Pol: 5s de fotoativação inicial, bisturi, fotoativação final e polimento. Após 24 h, a rugosidade da região de margem das amostras foi analisada utilizando um rugosímetro (Mitutoyo SJ-400 Tóquio, Japão; três medições em cada amostra). Análise micromorfológica da região foi obtida por microscópio estereoscópico e MEV. Em seguida, as amostras foram contaminadas em caldo de sacarose com suspensão padronizada com Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus e Candida albicans e incubados por um período de 48 h. As amostras foram analisadas quantitativamente para aderência bacteriana na região da margem por microscopia de varredura confocal a laser e contagem das unidades formadoras de colônias(UFC/mL), e analisadas qualitativamente usando MEV. Os dados de rugosidade superficial (Ra) foram submetidos à análise de variância (2- way), teste de Tukey (5%) e teste t-student. Os dados de UFC, biomassa e ...

This study evaluated the effects of excess cement removal techniques,with or with out posterior polishing, on the biofilm formation and micromorphology in the marginal region of the tooth/restoration. From bovine teeth, 96 dentin blocks (4 x 8 x 2 mm) were produced, molded andre produced in type IV gyps um, on which 96 pressed ceramic blocks (VitaPM9 4 mm x 8 mm x 2 mm, Vita Zahnfabrik) were produces via lost wax technique. The dentin blocks and their respective ceramic blocks were cemented with a self-adhesive resin-cement (RelyX U200, 3M ESPE) and cement excess was removed using different techniques, followed by polishing with silicone tips or, in some cases, not polished at all: MBr:microbrush and photo activation, MBr-Pol: MBr + polishing, Pi: brush andphotoa ctivation, Pi-Pol: PI + polishing, Photo-Expl: 5 s initial photo activation, explorer and final curing, Photo-Expl-Pol: Photo-Expl +polishing, Photo-Bi: 5 s initial photo activation, scalpel and final curing,Photo-Bi-Pol: Photo-Bi + polishing. After 24 hours, the samples marginal region roughness was analyzed using a profilometer (Mitutoyo SJ-400 Tokyo, Japan; three measurements on each sample). Micromorphological analyses of the region were performed by stereoscopic microscope andSEM. Then the samples were contaminated with sucrose broth standardized suspension with Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus and Candida albicans and incubated for a period of 48 hours. The samples were quantitatively analyzed for bacterial adherence in the marginal region by confocal laser scanning microscopy and counting ofcolony forming units (CFU/ml), and qualitatively analyzed using SEM.Roughness data (Ra) were submitted to 2-way ANOVA, Tukey test (5%)and Student's-t tests. CFU, Biomass and bio thickness data were analyzedby Kruskal Wallis’, Mann-Whitney’s e Dunn’s tests. The removing technique statistically influenced the roughness (Ra; p ˂ 0.05), when comparing polished and un polished groups. The MBr and ...

Óleo essencial de Rosmarinus officinalis L. como sanitizante natural para controle de bactérias sésseis em superfície utilizada para corte de alimentos / Essential oil of Rosmarinus officinalis L. as natural sanitizer for controlling the sessile bacteria and as antimicrobial on the food-cutting surfaces

Objetivou-se neste estudo determinar as concentrações mínimas inibitórias (CMI) e as concentrações bactericidas mínimas (CBM) pela técnica de macrodiluição em caldo do óleo essencial (OE) de Rosmarinus officinalis L. sobre as cepas padrões de Staphylococcus aureus, Escherichia coli, SalmonellaCholeraesuis e Pseudomonas aeruginosa. Avaliou-se também a ação antibacteriana de soluções do OE sobre estes micro-organismos aderidos, por 12 h a 37 °C sob agitação, em superfície de polipropileno utilizada para corte de alimentos. As soluções sanitizantes de OE foram formuladas com base nos valores encontrados nas CBM, para cada estirpe bacteriana separadamente. A ação sanitizante da solução contra as células aderidas à superfície foi avaliada após 20 e 40 minutos de contato. Para E. coli, S. Choleraesuise P. aeruginosa, o tempo de 20 minutos de contato foi suficiente para a remoção total das células aderidas, e para S. aureus houve redução significativa para ambos os períodos avaliados. O OE de alecrim pode ser considerado como alternativa natural para realizar o controle de bactérias patogênicas e contaminantes na indústria de alimentos...

Nitrogen starvation affects bacterial adhesion to soil / Adesão de bactérias desnutridas por nitrogênio a solo

One of the main factors limiting the bioremediation of subsoil environments based on bioaugmentation is the transport of selected microorganisms to the contaminated zones. The characterization of the physiological responses of the inoculated microorganisms to starvation, especially the evaluation of characteristics that affect the adhesion of the cells to soil particles, is fundamental to anticipate the success or failure of bioaugmentation. The objective of this study was to investigate the effect of nitrogen starvation on cell surface hydrophobicity and cell adhesion to soil particles by bacterial strains previously characterized as able to use benzene, toluene or xilenes as carbon and energy sources. The strains LBBMA 18-T (non-identified), Arthrobacter aurescens LBBMA 98, Arthrobacter oxydans LBBMA 201, and Klebsiella sp. LBBMA 204-1 were used in the experiments. Cultivation of the cells in nitrogen-deficient medium caused a significant reduction of the adhesion to soil particles by all the four strains. Nitrogen starvation also reduced significantly the strength of cell adhesion to the soil particles, except for Klebsiella sp. LBBMA 204-1. Two of the four strains showed significant reduction in cell surface hydrophobicity. It is inferred that the efficiency of bacterial transport through soils might be potentially increased by nitrogen starvation.

Um dos principais fatores limitantes da biorremediação in situ de solos subterrâneos, baseada na bioaumentação, é o transporte dos microrganismos selecionados até o local contaminado. A caracterização das respostas fisiológicas dos microrganismos introduzidos no subsolo a condições de escassez nutricional, notadamente a avaliação de características que afetam a adesão celular ao solo, é fundamental para se prever o sucesso da bioaumentação. O objetivo deste trabalho foi determinar o efeito da desnutrição em meio com escassez de nitrogênio sobre a hidrofobicidade celular e a adesão ao solo de quatro isolados bacterianos previamente caracterizados como capazes de utilizar benzeno, tolueno ou xileno como fonte de carbono e energia. As linhagens LBBMA 18-T (não identificada), Arthrobacter aurescens LBBMA 98, Arthrobacter oxydans LBBMA 201, and Klebsiella sp. LBBMA 204-1 foram utilizadas nos experimentos. O cultivo das células em meio deficiente em nitrogênio causou uma redução significante na força de adesão das células às partículas do solo, exceto para a Klebsiella sp. LBBMA 204-1. Dois dos quatro isolados estudados sofreram alteração significativa na hidrofobicidade celular. Os resultados sugerem que a eficiência do transporte bacteriano através do solo pode ser aumentada pela desnutrição celular.